ColE1 - ColE1

ColE1 это плазмида нашел в бактерии. Его название происходит от того факта, что он несет ген колицин E1 ( cea ген). Он также кодирует иммунитет от этого продукта с имм ген. Кроме того, плазмида имеет ряд подвижностей (толпа) гены. Его размер и наличие единого EcoRI сайт признания заставил его рассматривать как вектор кандидат.[1]

Репликация

Репликация ColE1 начинается в источник. 555бп выше этой точки РНК-полимераза инициирует транскрипцию РНКII, которая действует как препраймер и начинает синтез ведущая прядь. Транскрипт сворачивается во вторичную структуру, которая стабилизирует взаимодействие между зарождающейся РНК и исходной ДНК. На этот гибрид нападают РНКаза H, который расщепляет цепь РНК, обнажая 3'-гидроксильную группу. Это позволяет удлинить ведущую нить на ДНК-полимераза I. Позднее синтез отстающей цепи инициируется примазой, кодируемой клеткой-хозяином.1 Репликация полностью осуществляется белками-хозяевами (РНК-полимеразой, ДНК-полимеразой I и РНКазой H), так что ингибирование трансляции остановит рост клеток, но не репликация ColE1. Поскольку трансляция белка Rop также будет ингибироваться, в этих клетках будет получено более высокое, чем обычно, количество копий.

Копировать контроль номера

RNAI является контртранскриптом к участку РНКII и, таким образом, связывается с его 5'-концом. Это изменяет укладку РНКII, так что гибрид ДНК-РНК не стабилизируется и не происходит расщепления. Это гарантирует, что при высоком копировать числа, репликация замедляется из-за увеличения концентрации РНК1. Роп является вторичным репрессором репликации, он стабилизирует гибрид RNAI-RNAII. Rop может быть особенно важен для предотвращения неконтролируемой репликации при медленных темпах роста.

Контроль репликации ColE1

ColE1 имеет номер копии 25-30 в соответствии с его оригинальной публикацией. [2]

Рекомендации

  1. ^ Hershfield, V; и другие. (1974). «Плазмида ColE1 как молекулярный носитель для клонирования и амплификации ДНК». Труды Национальной академии наук. 71 (9): 3455–59. Дои:10.1073 / пнас.71.9.3455. ЧВК  433792. PMID  4610576.
  2. ^ Hershfield, V; и другие. (1974). «Плазмида ColE1 как молекулярный носитель для клонирования и амплификации ДНК». Труды Национальной академии наук. 71 (9): 3455–59. Дои:10.1073 / пнас.71.9.3455. ЧВК  433792. PMID  4610576.