Штрих-кодирование ДНК - DNA barcoding

Схема штрих-кодирования ДНК

Штрих-кодирование ДНК это метод определения вида с использованием короткого раздела ДНК из конкретного ген или гены. Предпосылка штрих-кодирования ДНК заключается в том, что по сравнению с эталонной библиотекой таких участков ДНК (также называемых "последовательности "), отдельная последовательность может использоваться для однозначной идентификации организма по виду, точно так же, как сканер супермаркета использует знакомые черные полосы Штрих-код UPC для идентификации товара на складе по его справочной базе данных.[1] Эти «штрих-коды» иногда используются для идентификации неизвестных разновидность, части организма или просто каталогизировать столько таксоны насколько это возможно, или для сравнения с традиционной таксономией с целью определения границ видов.

Различные участки генов используются для идентификации различных групп организмов с помощью штрих-кодирования. Наиболее часто используемый штрих-код для животных и некоторых протисты является частью цитохром c оксидаза I (COI или COX1 ) ген, обнаруженный в митохондриальная ДНК. Другие гены, подходящие для штрих-кодирования ДНК, - это внутренняя расшифрованная прокладка (ЭТО) рРНК часто используется против грибков и RuBisCO используется для растений.[2][3] Микроорганизмы обнаруживаются с использованием разных участков генов. В 16S рРНК ген, например, широко используется для идентификации прокариот, тогда как 18S рРНК ген в основном используется для обнаружения микробных эукариоты. Эти участки генов выбраны потому, что они имеют меньшую внутривидовую (внутривидовую) вариацию, чем межвидовую (между видами) вариацию, которая известна как «разрыв штрих-кодирования».[4]

Некоторые применения штрих-кодирования ДНК включают: идентификацию листьев растений, даже когда цветы или фрукты недоступны; идентификация пыльца собираются на трупах животных-опылителей; выявление личинок насекомых, у которых может быть меньше диагностических признаков, чем у взрослых особей; или исследование диеты животного на основе содержимого его желудка, слюны или фекалий.[5] Когда штрих-кодирование используется для идентификации организмов из образца, содержащего ДНК более чем одного организма, термин Метабаркодирование ДНК используется,[6][7] например Метабаркодирование ДНК сообществ диатомовых водорослей в реках и ручьях, который используется для оценки качества воды.[8]

Фон

Методы штрих-кодирования ДНК были разработаны на основе ранних работ по секвенированию ДНК микробных сообществ с использованием 5S. рРНК ген.[9] В 2003 году конкретные методы и терминология современного штрих-кодирования ДНК были предложены в качестве стандартизованного метода идентификации видов, а также потенциально отнесения неизвестных последовательностей к более высоким таксонам, таким как отряды и типы, в статье Пол Д. Н. Хеберт и другие. от Университет Гвельфа, Онтарио, Канада.[10] Хеберт и его коллеги продемонстрировали полезность цитохрома. c ген оксидазы I (COI), впервые использованный Folmer et al. в 1994 г., используя опубликованные Праймеры ДНК как инструмент филогенетического анализа на уровне видов[10] в качестве подходящего инструмента различения между многоклеточными беспозвоночными.[11] «Область Фолмера» гена COI обычно используется для различения таксонов на основе его паттернов изменчивости на уровне ДНК. Относительная легкость восстановления последовательности и изменчивость, смешанная с сохранением между видами, являются одними из преимуществ ИСП. Называя профили «штрих-кодами», Hebert et al. предусмотрена разработка базы данных ИСП, которая могла бы служить основой для «глобальной системы биоидентификации».

Методология

Отбор и сохранение образцов

Штрих-кодирование может быть выполнено из ткани целевого образца, из смеси организмов (основной образец) или из ДНК, присутствующей в образцах окружающей среды (например, воды или почвы). Методы отбора, хранения или анализа образцов различаются для разных типов образцов.

Образцы тканей

Для штрих-кодирования образца ткани из целевого образца, вероятно, будет достаточно небольшого кусочка кожи, весов, ножки или антенны (в зависимости от размера образца). Чтобы избежать загрязнения, необходимо стерилизовать использованные инструменты между пробами. Рекомендуется отобрать два образца от одного образца, один для архивации, а другой для процесса штрих-кодирования. Сохранение образцов имеет решающее значение для решения проблемы деградации ДНК.

Массовые образцы

Основная проба - это образец окружающей среды, содержащий несколько организмов из таксономическая группа в стадии изучения. Разница между объемными образцами (в том смысле, как здесь используется) и другими образцами из окружающей среды заключается в том, что объемный образец обычно обеспечивает большое количество ДНК хорошего качества.[12] Примеры массивных образцов включают образцы водных макробеспозвоночных, собранные с помощью сети, или образцы насекомых, собранные с помощью ловушки Малеза. Отфильтрованные или фракционированные по размеру образцы воды, содержащие целые организмы, такие как одноклеточные эукариоты, также иногда определяются как объемные образцы. Такие образцы можно собирать с помощью тех же методов, которые используются для получения традиционных образцов для идентификации на основе морфологии.

образцы эДНК

В экологическая ДНК (eDNA) метод - это неинвазивный подход к обнаружению и идентификации видов на основе клеточного мусора или внеклеточной ДНК, присутствующих в образцах окружающей среды (например, воды или почвы), посредством штрих-кодирования или метабаркодирования. Подход основан на том факте, что каждый живой организм оставляет ДНК в окружающей среде, и эта экологическая ДНК может быть обнаружена даже для организмов, численность которых очень низкая. Таким образом, для отбора проб в полевых условиях наиболее важной частью является использование материалов и инструментов, свободных от ДНК, на каждом участке отбора проб или пробе, чтобы избежать контаминации, если ДНК целевого организма (организмов), вероятно, присутствует в небольших количествах. С другой стороны, образец эДНК всегда включает ДНК цельноклеточных живых микроорганизмов, которые часто присутствуют в больших количествах. Поэтому образцы микроорганизмов, взятые в естественной среде, также называются образцами эДНК, но загрязнение в этом контексте менее проблематично из-за большого количества организмов-мишеней. Метод eDNA применяется к большинству типов образцов, таких как вода, отложения, почва, фекалии животных, содержимое желудка или кровь, например, из пиявки.[13]

Извлечение ДНК, амплификация и секвенирование

Для штрих-кодирования ДНК требуется, чтобы ДНК из образца была извлечена. Несколько разных Извлечение ДНК методы существуют, и такие факторы, как стоимость, время, тип образца и выход, влияют на выбор оптимального метода.

Когда ДНК из образцов организмов или эДНК амплифицируется с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР), на реакцию могут отрицательно повлиять молекулы ингибитора, содержащиеся в образце.[14] Удаление этих ингибиторов имеет решающее значение для обеспечения доступности ДНК высокого качества для последующего анализа.

Усиление извлеченной ДНК является обязательным этапом штрих-кодирования ДНК. Как правило, только небольшой фрагмент общего материала ДНК последовательный (обычно 400–800 пар оснований )[15] для получения штрих-кода ДНК. Амплификация материала eDNA обычно ориентирована на меньшие размеры фрагментов (<200 пар оснований), поскольку eDNA, скорее всего, будет фрагментирована, чем материал ДНК из других источников. Однако некоторые исследования утверждают, что нет никакой взаимосвязи между размером ампликона и скоростью обнаружения eDNA.[16][17]

Секвенсоры HiSeq в SciLIfeLab в Уппсале, Швеция. Фотография сделана во время экскурсии по курсу SLU PNS0169 в марте 2019 года.

Когда область маркера штрих-кода ДНК будет амплифицирована, следующим шагом будет секвенирование области маркера с использованием Секвенирование ДНК методы.[18] Доступно множество различных платформ секвенирования, и технические разработки быстро развиваются.

Выбор маркера

Схематическое изображение праймеров и целевой области, продемонстрированных на гене 16S рРНК в Псевдомонады. В качестве праймеров обычно выбирают короткие консервативные последовательности с низкой вариабельностью, которые, таким образом, могут амплифицировать большинство или все виды в выбранной целевой группе. Праймеры используются для амплификации высоко вариабельной целевой области между двумя праймерами, которая затем используется для различения видов. Изменено из «Переменного числа копий, внутригеномной неоднородности и бокового переноса гена 16S рРНК у Pseudomonas» Бодилиса, Джосселина; Нсигуэ-Мейло, Сандрин; Безаури, Людовик; Quillet, Laurent, используется согласно CC BY, доступно по адресу: https://www.researchgate.net/figure/Hypervariable-regions-within-the-16S-rRNA-gene-in-Pseudomonas-The-plotted-line-reflects_fig2_224832532.

Маркеры, используемые для штрих-кодирования ДНК, называются штрих-кодами. Для успешной характеристики видов на основе штрих-кодов ДНК решающее значение имеет выбор информативных участков ДНК. Хороший штрих-код ДНК должен иметь низкий внутривидовой и высокий межвидовой изменчивость[10] и обладать консервированный фланговые площадки для разработки универсальных ПЦР грунтовки для широкого таксономический заявление. Цель состоит в том, чтобы разработать праймеры, которые будут обнаруживать и различать большинство или все виды в исследуемой группе организмов (высокое таксономическое разрешение). Длина последовательности штрих-кода должна быть достаточно короткой, чтобы ее можно было использовать с текущим источником отбора проб. Извлечение ДНК, усиление и последовательность действий методы.[19]

В идеале один ген последовательность будет использоваться для всех таксономических групп, начиная с вирусы к растения и животные. Однако такой участок гена еще не обнаружен, поэтому для разных групп организмов используются разные штрих-коды,[20] или в зависимости от вопроса исследования.

За животные, наиболее широко используемый штрих-код - митохондриальный цитохром С оксидаза I (COI) локус.[21] Другие митохондриальные гены, такие как Cytb, 12S или же 18S также используются. Митохондриальные гены предпочтительнее ядерные гены из-за отсутствия интроны, их гаплоидный режим наследование и их ограниченный рекомбинация.[21][22] Более того, каждый клетка имеет различные митохондрии (до нескольких тысяч) и каждая из них содержит несколько кольцевая ДНК молекулы. Таким образом, митохондрии могут служить обильным источником ДНК, даже если образец ткани ограничен.[20]

В растенияоднако митохондриальные гены не подходят для штрих-кодирования ДНК, потому что они демонстрируют низкий частота мутаций.[23] Несколько генов-кандидатов были обнаружены в хлоропласт геном, наиболее многообещающее существо матураза К ген (matK) сам по себе или в сочетании с другими генами. Мульти-локус маркеры, такие как рибосомные внутренние расшифрованные прокладки (ЕГО ДНК) вместе с matK, rbcL, trnH или другие гены также использовались для идентификации видов.[20] Наилучшее различение видов растений достигается при использовании двух или более штрих-кодов хлоропластов.[24]

За бактерии, малая субъединица рибосомальной РНК (16S ) может быть использован для разных таксонов, так как он высококонсервативен.[25] Некоторые исследования предполагают COI,[26] тип II шаперонин (cpn60)[27] или β-субъединица РНК-полимераза (rpoB)[28] также могут служить штрих-кодами бактериальной ДНК.

Штрих-кодирование грибы является более сложной задачей, и может потребоваться более одной комбинации праймеров.[29] В COI маркер хорошо работает с некоторыми группами грибов,[30] но не так хорошо в других.[31] Поэтому используются дополнительные маркеры, такие как ЭТО рДНК и большая субъединица ядерной рибосомной РНК (LSU).[32]

В группе протистыбыли предложены различные штрих-коды, такие как области D1 – D2 или D2 – D3 28S рДНК, Субрегион V4 18S рРНК ген, ЭТО рДНК и COI. Кроме того, некоторые специальные штрих-коды могут использоваться для фотосинтетический простейшие, например большая подгруппа рибулозо-1,5-бисфосфаткарбоксилаза-оксигеназа ген (rbcL) и хлоропласт 23S рРНК ген.[20]

Маркеры, которые использовались для штрих-кодирования ДНК в различных группах организмов, модифицированы из Purty и Chatterjee.[20]
Группа организмовМаркерный ген / локус
ЖивотныеCOI,[33] Cytb,[34] 12S,[35] 16S[36]
РастенияmatK,[37] rbcL,[38] psbA-trnH,[39] ЭТО[40]
БактерииCOI,[26] rpoB,[28] 16S,[41] cpn60,[27] туф,[42] РИФ,[43] земля[44]
ГрибыЭТО,[2][45] TEF1α,[46][47] RPB1 (LSU), RPB2 (LSU), 18S (СумГУ)[32]
ПротистыЭТО,[48] COI,[49] rbcL,[50] 18S,[51] 28S[50]

Справочные библиотеки и биоинформатика

Справочные библиотеки используются для таксономической идентификации, также называемой аннотацией, последовательностей, полученных путем штрих-кодирования или метабаркодирования. Эти базы данных содержат штрих-коды ДНК, присвоенные ранее идентифицированным таксонам. Большинство справочных библиотек не охватывают все виды внутри группы организмов, и постоянно создаются новые записи. В случае макро- и многих микроорганизмов (например, водорослей) для этих справочных библиотек требуется подробная документация (место и дата взятия пробы, лицо, взявшее ее, изображение и т. Д.), А также официальная таксономическая идентификация образца ваучера, а также представление последовательностей в определенном формате. Этот процесс также требует хранения ваучеров в музейных коллекциях и других сотрудничающих учреждениях. И таксономически полный охват, и качество контента важны для точности идентификации.[52] Существует несколько баз данных ссылок в зависимости от группы организмов и используемого генетического маркера. Существуют более мелкие национальные базы данных (например, FinBOL) и крупные консорциумы, такие как Международный проект штрих-кода жизни (iBOL).[53]

СМЕЛЫЙ

Запущенный в 2007 году, Штрих-код системы данных о жизни (СМЕЛЫЙ)[54] - одна из крупнейших баз данных, содержащая более 450000 BIN (номеров индекса штрих-кода) в 2019 году. Это свободно доступный репозиторий для записей образцов и последовательностей для исследований штрих-кода, а также инструмент, помогающий управлению, обеспечению качества и анализ данных штрих-кода. База данных в основном содержит записи BIN для животных на основе генетического маркера COI.

ОБЪЕДИНЯЙТЕ

База данных UNITE[55] была запущена в 2003 году и представляет собой справочную базу данных для молекулярной идентификации видов грибов с помощью области генетического маркера внутреннего транскрибированного спейсера (ITS). Эта база данных основана на концепции видовых гипотез: вы выбираете процент, с которым хотите работать, и последовательности сортируются по сравнению с последовательностями, полученными из ваучерных образцов, идентифицированных экспертами.

Diat.barcode

Diat.barcode[56] база данных впервые была опубликована под названием R-syst :: diatom[57] в 2016 году, начиная с данных из двух источников: коллекции культур Тонона (TCC) на гидробиологической станции Французского национального института сельскохозяйственных исследований (INRA) и из базы данных нуклеотидов NCBI (Национальный центр биотехнологической информации). Diat.barcode предоставляет данные для двух генетических маркеров, rbcL (рибулозо-1,5-бисфосфаткарбоксилаза / оксигеназа) и 18S (18S рибосомная РНК). База данных также включает дополнительную информацию о признаках видов, например, морфологические характеристики (биобъем, размеры и т. Д.), Формы жизни (мобильность, тип колонии и т. Д.) Или экологические характеристики (чувствительность к загрязнению и т. Д.).

Биоинформатический анализ

Чтобы получить хорошо структурированные, чистые и интерпретируемые данные, необработанные данные секвенирования должны быть обработаны с использованием биоинформатического анализа. В FASTQ файл с данными секвенирования содержит два типа информации: последовательности, обнаруженные в образце (ФАСТА файл) и файл качества с показателями качества (PHRED оценки), связанных с каждым нуклеотидом каждой последовательности ДНК. Показатели PHRED указывают на вероятность того, что соответствующий нуклеотид был правильно подсчитан.

Показатель качества PHRED и связанный с ним уровень достоверности
1090%
2099%
3099.9%
4099.99%
5099.999%

Как правило, оценка PHRED снижается к концу каждой последовательности ДНК. Таким образом, некоторые конвейеры биоинформатики просто обрезают конец последовательностей на определенном пороге.

Некоторые технологии секвенирования, такие как MiSeq, используют секвенирование с парным концом, во время которого секвенирование выполняется в обоих направлениях, обеспечивая лучшее качество. Затем перекрывающиеся последовательности выравнивают в контиги и объединяют. Обычно за один прогон объединяют несколько образцов, и каждый образец характеризуется коротким фрагментом ДНК - меткой. На этапе демультиплексирования последовательности сортируются с использованием этих тегов для повторной сборки отдельных образцов. Перед дальнейшим анализом метки и другие адаптеры удаляют из фрагмента ДНК штрих-кодирующей последовательности. Во время обрезки удаляются последовательности плохого качества (низкие оценки PHRED) или последовательности, которые намного короче или длиннее целевого штрих-кода ДНК. Следующий этап дерепликации - это процесс, в котором все отфильтрованные по качеству последовательности сворачиваются в набор уникальных считываний (ISU отдельных единиц последовательности) с информацией об их количестве в выборках. После этого химеры (то есть составные последовательности, образованные из частей смешанного происхождения) обнаруживаются и удаляются. Наконец, последовательности группируются в OTU (Operational Taxonomic Units), используя одну из многих стратегий кластеризации. К наиболее часто используемым биоинформатическим программам относятся Mothur,[58] Грубо,[59] Цимэ,[60] Галактика,[61] Обитоолы,[62] ДЖЕМП,[63] Барк,[64] и DADA2.[65]

Сравнение количества считываний, то есть последовательностей, между разными образцами по-прежнему является проблемой, потому что как общее количество считываний в образце, так и относительное количество считываний для вида может варьироваться в зависимости от образца, метода или других переменных. Затем для сравнения можно уменьшить количество считываний каждой выборки до минимального количества считываний сравниваемых выборок - процесс, называемый разрежением. Другой способ - использовать относительное обилие чтений.[66]

Идентификация видов и таксономическая принадлежность

Таксономическое отнесение OTU к видам достигается путем сопоставления последовательностей со справочными библиотеками. Инструмент поиска базового локального выравнивания (BLAST) обычно используется для выявления областей сходства между последовательностями путем сравнения считывания последовательностей из образца с последовательностями в эталонных базах данных.[67] Если справочная база данных содержит последовательности соответствующих видов, то последовательности образцов могут быть идентифицированы до уровня вида. Если последовательность не может быть сопоставлена ​​с существующей записью справочной библиотеки, штрих-кодирование ДНК может быть использовано для создания новой записи.

В некоторых случаях из-за неполноты справочных баз данных идентификация может быть достигнута только на более высоких таксономических уровнях, таких как отнесение к семейству или классу. В некоторых группах организмов, таких как бактерии, таксономическое отнесение к уровню вида часто невозможно. В таких случаях образец может быть отнесен к конкретному операционная таксономическая единица (OTU).

Приложения

Применение штрих-кодирования ДНК включает идентификацию новых разновидность, оценка безопасности пищевых продуктов, идентификация и оценка скрытых видов, обнаружение чужеродных видов, идентификация находящихся под угрозой исчезновения и угрожаемые виды,[68] привязка стадий яиц и личинок к взрослым видам, обеспечение прав интеллектуальной собственности на биоресурсы, разработка глобальных планов управления для стратегий сохранения и выяснение кормовых ниш.[69] Маркеры штрих-кода ДНК могут применяться для решения основных вопросов систематики, экология, эволюционная биология и сохранение, включая собрание сообщества, взаимодействие видов сетей, таксономических открытий и оценки приоритетных областей для защита окружающей среды.

Идентификация видов

Конкретные короткие последовательности ДНК или маркеры из стандартизированной области генома могут обеспечить штрих-код ДНК для идентификации видов.[70] Молекулярные методы особенно полезны, когда традиционные методы не применимы. Штрих-кодирование ДНК широко применяется для идентификации личинок, для которых, как правило, имеется мало диагностических признаков, а также для связи различных стадий жизни (например, личинки и взрослой особи) у многих животных.[71] Идентификация видов, перечисленных в Конвенции о международной торговле видами, находящимися под угрозой исчезновения (СИТЕС ) приложения, использующие методы штрих-кодирования, используются в мониторинге незаконной торговли.[72]

Обнаружение инвазивных видов

Чужеродные виды может быть обнаружен с помощью штрих-кодирования.[73][74] Штрих-кодирование может быть подходящим для обнаружения видов, например, в пограничный контроль, где быстрая и точная морфологическая идентификация часто невозможна из-за сходства между разными видами, отсутствия достаточных диагностических характеристик[73] и / или отсутствие таксономической экспертизы. Штрих-кодирование и метабаркодирование также могут использоваться для проверки экосистемы для инвазивных видов и для различения инвазивных видов и местных, морфологически похожих видов.[75]

Определение границ загадочных видов

Штрих-кодирование ДНК позволяет идентифицировать и распознавать загадочные виды.[76] Однако результаты анализа штрих-кодов ДНК зависят от выбора аналитических методов, поэтому процесс определения границ загадочных видов с использованием штрих-кодов ДНК может быть таким же субъективным, как и любая другая форма таксономия. Hebert et al. (2004) пришли к выводу, что бабочка Astraptes fulgerator на северо-западе Коста-Рики фактически состоит из 10 различных видов.[77] Эти результаты, однако, были впоследствии оспорены Брауэром (2006), который указал на многочисленные серьезные недостатки анализа и пришел к выводу, что исходные данные могут подтвердить не более чем возможность трех-семи загадочных таксоны а не десять загадочных видов.[78] Smith et al. (2007) использовали цитохром c ДНК-штрих-коды оксидазы I для видовой идентификации 20 морфовидов Белвосия паразитоидные мухи (Двукрылые: Тахиниды ) выращенные из гусениц (Чешуекрылые ) в Area de Conservación Guanacaste (ACG), на северо-западе Коста-Рики. Эти авторы обнаружили, что штрих-код увеличивает количество видов до 32, обнаруживая, что каждый из трех паразитоид Виды, ранее считавшиеся универсальными, на самом деле представляют собой группы криптических видов, в высокой степени специфичных для хозяев.[79] Для 15 морфовидов полихеты в глубине Антарктика бентос при исследовании с помощью штрих-кодирования ДНК загадочное разнообразие было обнаружено в 50% случаев. Кроме того, было обнаружено 10 ранее упускаемых из виду морфовидов, что увеличило общее видовое богатство в выборке на 233%.[80]

Штрих-кодирование - это инструмент, позволяющий гарантировать качество продуктов питания. Здесь ДНК из традиционных норвежских рождественских блюд извлекается в молекулярной систематической лаборатории в университетском музее NTNU.

Анализ диеты и приложение food web

Штрих-кодирование ДНК и метабаркодирование могут быть полезны в исследованиях по анализу рациона,[81] и обычно используется, если особи добычи не могут быть идентифицированы по морфологическим признакам.[82][83] Существует ряд подходов к отбору проб при анализе рациона: метабаркодирование ДНК может проводиться на содержимом желудка,[84] кал,[83][85] слюна[86] или анализ всего тела.[68][87] В образцах фекалий или сильно переваренном содержимом желудка часто невозможно отличить ткань от одного вида, поэтому вместо этого можно применить метабаркодирование.[83][88] Кал или слюна представляют собой неинвазивные методы отбора проб, в то время как анализ всего тела часто означает, что сначала нужно убить человека. Для более мелких организмов секвенирование содержимого желудка часто выполняется путем секвенирования всего животного.

Штрих-кодирование для безопасности пищевых продуктов

Штрих-кодирование ДНК представляет собой важный инструмент для оценки качества пищевых продуктов. Цель состоит в том, чтобы гарантировать прослеживаемость пищевых продуктов, свести к минимуму пищевое пиратство и оценить местную и типичную агропродовольственную продукцию. Другая цель - охрана здоровья населения; например, метабаркодирование дает возможность идентифицировать групперы вызывая Ciguatera отравление рыбой остатками еды,[89] или отделить ядовитые грибы от съедобных (Лит.).

Биомониторинг и экологическая оценка

Штрих-кодирование ДНК может использоваться для оценки присутствия исчезающих видов в целях сохранения (ссылка) или наличия индикаторных видов, отражающих конкретные экологические условия (ссылка), например избыток питательных веществ или низкий уровень кислорода.

Возможности и недостатки

Потенциал

Традиционные методы биооценки хорошо зарекомендовали себя на международном уровне и хорошо служат для биомониторинга, например, для водной биооценки в рамках Директив ЕС. WFD и MSFD. Однако штрих-кодирование ДНК может улучшить традиционные методы по следующим причинам; Штрих-кодирование ДНК (i) может повысить таксономическое разрешение и гармонизировать идентификацию таксонов, которые трудно идентифицировать или которых не хватает экспертов, (ii) может более точно / точно связать экологические факторы с конкретными таксонами (iii) может повысить сопоставимость между регионами, (iv) позволяет включать ранние стадии жизни и фрагментированные образцы, (v) позволяет разграничить загадочный / Редкие виды (vi) позволяет разработать новые индексы, например редкие / загадочные виды, которые могут быть чувствительны / толерантны к стрессоры, (vii) увеличивает количество образцов, которые могут быть обработаны, и сокращает время обработки, что приводит к расширению знаний об экологии видов, (viii) является неинвазивным способом мониторинга при использовании Эдна методы.[90]

Время и стоимость

Штрих-кодирование ДНК выполняется быстрее, чем традиционные морфологические методы, от обучения до таксономического назначения. Чтобы получить опыт в методах ДНК, нужно меньше времени, чем стать экспертом в области таксономии. Кроме того, рабочий процесс штрих-кодирования ДНК (то есть от образца к результату), как правило, быстрее, чем традиционный морфологический рабочий процесс, и позволяет обрабатывать больше образцов.

Таксономическое разрешение

Штрих-кодирование ДНК позволяет разделить таксоны от более высоких (например, семейства) до более низких (например, видов) таксономических уровней, которые в противном случае слишком сложно идентифицировать с использованием традиционных морфологических методов, таких как, например, идентификация с помощью микроскопии. Например, Chironomidae (неклевы) широко распространены как в наземных, так и в пресноводных экосистемах. Их богатство и изобилие делают их важными для экологических процессов и сетей, и они являются одной из многих групп беспозвоночных, используемых в биомониторинге. Образцы беспозвоночных могут содержать до 100 видов хирономид, которые часто составляют до 50% образца. Несмотря на это, их обычно не определяют ниже уровня семьи из-за необходимых таксономических знаний и времени.[91] Это может привести к тому, что различные виды хирономид с разными экологическими предпочтениями будут сгруппированы вместе, что приведет к неточной оценке качества воды.

Штрих-кодирование ДНК дает возможность определить таксоны и напрямую связать стрессорные эффекты с конкретными таксонами, такими как отдельные виды хирономид. Например, Beermann et al. (2018) ДНК со штрих-кодом Chironomidae для изучения их реакции на несколько стрессоров; уменьшение потока, увеличение количества мелких отложений и повышение солености.[92] После штрих-кодирования было установлено, что образец хирономид состоял из 183 Оперативные таксономические единицы (OTU), то есть штрих-коды (последовательности), которые часто эквивалентны морфологическим видам. Эти 183 OTU отображали 15 типов ответов, а не ранее сообщалось [93] два типа ответа, зарегистрированные, когда все хирономиды были сгруппированы вместе в одном исследовании множественных стрессоров.Аналогичная тенденция была обнаружена в исследовании Macher et al. (2016), которые обнаружили загадочное разнообразие у новозеландских поденок. Deleatidium sp. Это исследование выявило различные паттерны реакции 12 различных молекулярных OTU на стрессоры, которые могут изменить консенсус о том, что эта поденка чувствительна к загрязнению.[94]

Недостатки

Несмотря на преимущества, предлагаемые штрих-кодированием ДНК, также было высказано предположение, что штрих-кодирование ДНК лучше всего использовать в качестве дополнения к традиционным морфологическим методам.[90] Эта рекомендация основана на множестве предполагаемых проблем.

Физические параметры

Не совсем просто связать штрих-коды ДНК с экологическими предпочтениями рассматриваемого штрих-кода таксона, как это необходимо, если штрих-кодирование будет использоваться для биомониторинга. Например, обнаружение целевой ДНК в водных системах зависит от концентрации молекул ДНК на участке, на которую, в свою очередь, могут влиять многие факторы. Присутствие молекул ДНК также зависит от дисперсии в сайте, например направление или сила токов. На самом деле неизвестно, как ДНК перемещается в ручьях и озерах, что затрудняет отбор проб. Другим фактором может быть поведение целевых видов, например Рыбы могут иметь сезонные изменения в движении, раки или мидии выделяют ДНК в больших количествах только в определенные периоды своей жизни (линька, нерест). Что касается ДНК в почве, о ее распределении, количестве или качестве известно еще меньше. Основным ограничением метода штрих-кодирования является то, что он полагается на эталонные библиотеки штрих-кодов для таксономической идентификации последовательностей. Таксономическая идентификация верна только при наличии надежной ссылки. Однако большинство баз данных по-прежнему неполны, особенно для более мелких организмов, например грибы, фитопланктон, нематоды и т. д. Кроме того, текущие базы данных содержат неверные определения, орфографические ошибки и другие ошибки. В отношении баз данных для всех необходимых организмов прилагаются огромные усилия по курированию и завершению, включая крупные проекты по штрих-кодированию (например, проект iBOL для справочной базы данных Barcode of Life Data Systems (BOLD)).[95][96] Однако завершение и кураторство сложны и требуют времени. Без подтвержденных образцов нельзя быть уверенным в правильности последовательности, использованной в качестве эталона. Базы данных последовательностей ДНК, такие как GenBank, содержат множество последовательностей, не связанных с подтвержденные образцы (например, гербарные образцы, культивируемые клеточные линии или иногда изображения). Это проблематично перед лицом таксономических вопросов, например, следует ли разделять или объединять несколько видов или правильность прошлой идентификации. Повторное использование последовательностей, не связанных с подтвержденными образцами, изначально ошибочно идентифицированного организма может способствовать неверным выводам, и его следует избегать.[97] Таким образом, лучшая практика для штрих-кодирования ДНК - это секвенирование подтвержденных образцов.[98][99] Для многих таксонов, однако, может быть трудно получить эталонные образцы, например, с образцами, которые трудно поймать, имеющиеся образцы плохо сохраняются или отсутствует адекватная таксономическая экспертиза.[97] Важно отметить, что штрих-коды ДНК также могут использоваться для создания временной таксономии, и в этом случае OTU могут использоваться в качестве замены традиционных латинских биномов, что значительно снижает зависимость от полностью заполненных справочных баз данных.[100]

Технологический уклон

Штрих-кодирование ДНК также несет методологическую ошибку, от отбора проб до биоинформатика анализ данных. Помимо риска загрязнения образца ДНК ингибиторами ПЦР, смещение праймера является одним из основных источников ошибок при штрих-кодировании ДНК.[101][102] Выделение эффективного ДНК-маркера и разработка праймеров - сложный процесс, и были предприняты значительные усилия для разработки праймеров для штрих-кодирования ДНК в различных таксономических группах.[103] Однако праймеры часто предпочтительно связываются с некоторыми последовательностями, что приводит к дифференциальной эффективности и специфичности праймеров, а также к оценке нерепрезентативных сообществ и увеличению насыщенности.[104] Таким образом, на этапе ПЦР в основном изменяется состав последовательностей сообществ образца. Кроме того, репликация ПЦР часто требуется, но приводит к экспоненциальному увеличению риска контаминации. Несколько исследований подчеркнули возможность использования образцов, обогащенных митохондриями. [105][106] или подходы без ПЦР, чтобы избежать этих предубеждений, но на сегодняшний день метод метабаркодирования ДНК по-прежнему основан на секвенировании ампликонов.[103] Другие предвзятости присутствуют в картине во время секвенирования и во время биоинформатической обработки последовательностей, таких как создание химер.

Отсутствие стандартизации

Несмотря на то, что штрих-кодирование ДНК более широко используется и применяется, нет согласия относительно методов сохранения или извлечения ДНК, выбора маркеров ДНК и набора праймеров или протоколов ПЦР. Параметры биоинформатики трубопроводы (например, кластеризация OTU, алгоритмы таксономического присвоения или пороговые значения и т. д.) являются источником многих дискуссий среди пользователей штрих-кодирования ДНК.[103] Технологии секвенирования также стремительно развиваются вместе с инструментами для анализа огромных объемов генерируемых данных ДНК, и срочно необходима стандартизация методов для обеспечения совместной работы и обмена данными в более широком пространственном и временном масштабе. Стандартизация методов штрих-кодирования в европейском масштабе является частью целей Европейского сообщества COST Action DNAqua-net. [107] и также рассматривается CEN (Европейский комитет по стандартизации).[108]

Еще одна критика штрих-кодирования ДНК - это его ограниченная эффективность для точного распознавания ниже уровня видов (например, для различения разновидностей), для обнаружения гибридов, и что на него могут влиять темпы эволюции (ссылка необходима).

Несоответствие между стандартной (морфологической) идентификацией и идентификацией на основе штрих-кода

Важно знать, что списки таксонов, полученные путем традиционной (морфологической) идентификации, не могут и, возможно, никогда не будут напрямую сопоставимы со списками таксонов, полученными путем идентификации на основе штрих-кода, по нескольким причинам. Наиболее важной причиной, вероятно, является неполнота и недостаточная точность баз данных молекулярных ссылок, препятствующие правильному таксономическому отнесению последовательностей eDNA. Таксоны, отсутствующие в справочных базах данных, не будут обнаружены eDNA, а последовательности, связанные с неправильным названием, приведут к неправильной идентификации.[90] Другими известными причинами являются различный масштаб и размер выборки для традиционного и молекулярного образца, возможный анализ мертвых организмов, который может происходить по-разному для обоих методов в зависимости от группы организмов, и конкретный выбор идентификации в любом методе, т. Е. различный таксономический опыт или возможность идентифицировать определенные группы организмов, соответственно систематическая ошибка праймера, приводящая также к потенциально предвзятому анализу таксонов.[90]

Оценки богатства / разнообразия

Штрих-кодирование ДНК может привести к переоценке или недооценке видового богатства и разнообразия. Некоторые исследования предполагают, что артефакты (идентификация видов, не присутствующих в сообществе) являются основной причиной раздутого биоразнообразия.[109][110] Наиболее проблемной проблемой являются таксоны, представленные низким числом считываний секвенирования. Эти чтения обычно удаляются в процессе фильтрации данных, поскольку различные исследования показывают, что большинство этих низкочастотных операций чтения могут быть артефактами.[111] Однако среди этих малонаселенных прочтений могут существовать действительно редкие таксоны.[112] Редкие последовательности могут отражать уникальные родословные в сообществах, что делает их информативными и ценными последовательностями. Таким образом, существует острая потребность в более надежных алгоритмах биоинформатики, которые позволяют различать информативные чтения и артефакты. Полные справочные библиотеки также позволили бы лучше тестировать алгоритмы биоинформатики, разрешая лучшую фильтрацию артефактов (то есть удаление последовательностей, не имеющих аналогов среди существующих видов), и, следовательно, было бы возможно получить более точное определение видов.[113] Загадочное разнообразие также может привести к раздутому биоразнообразию, поскольку один морфологический вид может фактически разделиться на множество различных молекулярных последовательностей.[90]

Метабаркодирование ДНК

Различия в стандартных методах штрих-кодирования ДНК и метабаркода. В то время как штрих-кодирование ДНК указывает на поиск определенного вида, метабаркодирование ищет все сообщество.

Метабаркодирование ДНК определяется как штрих-кодирование ДНК или же Эдна (ДНК окружающей среды), которая позволяет одновременно идентифицировать множество таксонов в одном (экологическом) образце, но часто в пределах одной и той же группы организмов. Основное различие между подходами заключается в том, что метабаркодирование, в отличие от штрих-кодирования, не фокусируется на одном конкретном организме, а вместо этого направлено на определение видового состава в образце.

Методология

Процедура метабаркодирования, как и обычное штрих-кодирование, охватывает этапы Извлечение ДНК, ПЦР-амплификация, последовательность действий и анализ данных. Штрих-код состоит из короткой переменной ген регион (например, см. разные маркеры / штрих-коды ), который полезен для таксономического определения, фланкированного высококонсервативными участками генов, которые можно использовать для грунтовка дизайн.[12] Используются разные гены в зависимости от того, ставится ли цель штрих-кодирование одного вида или метабаркодирование нескольких видов. В последнем случае используется более универсальный ген. Метабаркодирование не использует ДНК / РНК одного вида в качестве отправной точки, а использует ДНК / РНК нескольких разных организмов, полученных из одного образца окружающей среды или общего образца.

Приложения

Метабарочное кодирование может дополнять меры по сохранению биоразнообразия и даже заменять их в некоторых случаях, особенно по мере того, как технологические достижения и процедуры постепенно становятся более дешевыми, оптимизированными и широко распространенными.[114][115]

Приложения для метабаркодирования ДНК включают:

Преимущества и проблемы

Общие преимущества и недостатки штрихового кодирования, рассмотренные выше, справедливы также и для метабаркодирования. Одним из особых недостатков исследований метабаркодирования является отсутствие консенсуса в отношении оптимального экспериментального дизайна и критериев биоинформатики, которые должны применяться при метабаркодировании eDNA.[116] Однако есть текущие совместные попытки, например, сеть EU COST DNAqua-Net, чтобы двигаться вперед путем обмена опытом и знаниями для установления передовых стандартов биомониторинга.[90]

Смотрите также

Рекомендации

  1. ^ "Что такое штрих-кодирование ДНК?". iBOL. Получено 2019-03-26.
  2. ^ а б Schoch, Conrad L .; Seifert, Keith A .; Хундорф, Сабина; Роберт, Винсент; Spouge, John L .; Левеск, К. Андре; Чен, Вэнь; Консорциум по штрих-кодированию грибов (2012). «Ядерная рибосомная внутренняя транскрибируемая спейсерная область (ITS) как универсальный маркер штрих-кода ДНК для грибов» (PDF). Труды Национальной академии наук. 109 (16): 6241–6246. Дои:10.1073 / pnas.1117018109. ISSN  0027-8424. ЧВК  3341068. PMID  22454494.
  3. ^ CBOL Plant Working Group; Hollingsworth, P.M .; Форрест, Л. Л .; Spouge, J. L .; Hajibabaei, M .; Ratnasingham, S .; van der Bank, M .; Чейз, М. В .; Коуэн, Р. С. (4 августа 2009 г.). «Штрих-код ДНК для наземных растений». Труды Национальной академии наук. 106 (31): 12794–12797. Bibcode:2009PNAS..10612794H. Дои:10.1073 / pnas.0905845106. ISSN  0027-8424. ЧВК  2722355. PMID  19666622.
  4. ^ Паулай, Густав; Мейер, Кристофер П. (2005-11-29). «Штрих-кодирование ДНК: частота ошибок на основе комплексной выборки». PLOS Биология. 3 (12): e422. Дои:10.1371 / journal.pbio.0030422. ISSN  1545-7885. ЧВК  1287506. PMID  16336051.
  5. ^ Сойнинен, Эева М; Валентини, Алиса; Куассак, Эрик; Микель, Кристиан; Гилли, Людовик; Брохманн, Кристиан; Бристинг, Энн К.; Sønstebø, Jørn H; Имс, Рольф А (2009). «Анализ рациона мелких травоядных: эффективность штрих-кодирования ДНК в сочетании с высокопроизводительным пиросеквенированием для расшифровки состава сложных смесей растений». Границы зоологии. 6 (1): 16. Дои:10.1186/1742-9994-6-16. ISSN  1742-9994. ЧВК  2736939. PMID  19695081.
  6. ^ Крир, Саймон; Дейнер, Кристи; Фрей, Серита; Поразинская, Дорота; Таберле, Пьер; Томас, В. Келли; Поттер, Кейтлин; Бик, Холли М. (2016). Фреклтон, Роберт (ред.). «Полевое руководство эколога по последовательной идентификации биоразнообразия» (PDF). Методы в экологии и эволюции. 7 (9): 1008–1018. Дои:10.1111 / 2041-210X.12574.
  7. ^ "ScienceDirect". Успехи в экологических исследованиях. 58: 63–99. Январь 2018. Дои:10.1016 / bs.aecr.2018.01.001.
  8. ^ Васселон, Валентин; Риме, Фредерик; Тапольчай, Кальман; Бушез, Аньес (2017). «Оценка экологического состояния с помощью метабаркодирования ДНК диатомовых водорослей: расширение сети мониторинга ВРД (остров Майотта, Франция)». Экологические показатели. 82: 1–12. Дои:10.1016 / j.ecolind.2017.06.024. ISSN  1470–160X.
  9. ^ Woese, Carl R .; Кандлер, Отто; Уилис, Марк Л. (1990). «На пути к естественной системе организмов: предложение по доменам архей, бактерий и эукариев» (PDF). Труды Национальной академии наук. 87 (12): 4576–4579. Bibcode:1990PNAS ... 87,4576 Вт. Дои:10.1073 / pnas.87.12.4576. OCLC  678728346. ЧВК  54159. PMID  2112744.
  10. ^ а б c Hebert, Paul D. N .; Цивинская, Алина; Болл, Шелли Л .; ДеВаард, Джереми Р. (07.02.2003). «Биологическая идентификация с помощью штрих-кодов ДНК». Труды Королевского общества B: биологические науки. 270 (1512): 313–321. Дои:10.1098 / rspb.2002.2218. ISSN  1471-2954. ЧВК  1691236. PMID  12614582.
  11. ^ Folmer, O .; Черный, М .; Hoeh, W .; Lutz, R .; Вриенхук, Р. (октябрь 1994 г.). "Праймеры ДНК для амплификации субъединицы I митохондриальной цитохром с оксидазы из различных беспозвоночных многоклеточных". Молекулярная морская биология и биотехнология. 3 (5): 294–299. ISSN  1053-6426. PMID  7881515.
  12. ^ а б Пьер, Таберле (02.02.2018). Экологическая ДНК: для исследования и мониторинга биоразнообразия. Бонин, Орели, 1979-. Оксфорд. ISBN  9780191079993. OCLC  1021883023.
  13. ^ Джелгер Хердер; А. Валентини; Э. Беллемейн; Т. Дежан; J.J.C.W. Ван Делфт; ПФ. Томсен; П. Таберле (2014), Экологическая ДНК - обзор возможных применений для обнаружения (инвазивных) видов., РАВОН, Дои:10.13140 / rg.2.1.4002.1208
  14. ^ Schrader, C .; Schielke, A .; Ellerbroek, L .; Джон Р. (2012). «Ингибиторы ПЦР - возникновение, свойства и удаление». Журнал прикладной микробиологии. 113 (5): 1014–1026. Дои:10.1111 / j.1365-2672.2012.05384.x. ISSN  1365-2672. PMID  22747964. S2CID  30892831.
  15. ^ Саволайнен, Винсент; Коуэн, Робин С; Фоглер, Альфрид П.; Родерик, Джордж К; Лейн, Ричард (2005-10-29). «К написанию энциклопедии жизни: введение в штрих-кодирование ДНК». Философские труды Королевского общества B: биологические науки. 360 (1462): 1805–1811. Дои:10.1098 / rstb.2005.1730. ISSN  0962-8436. ЧВК  1609222. PMID  16214739.
  16. ^ Пигготт, Максин П. (2016). «Оценка влияния лабораторных протоколов на вероятность обнаружения eDNA для пресноводных рыб, находящихся под угрозой исчезновения». Экология и эволюция. 6 (9): 2739–2750. Дои:10.1002 / ece3.2083. ISSN  2045-7758. ЧВК  4798829. PMID  27066248.
  17. ^ Ма, Хунцзюань; Стюарт, Кэтрин; Лугид, Стивен; Чжэн, Цзиньсонг; Ван, Юйсян; Чжао, Цзяньфу (2016). «Характеристика, оптимизация и проверка маркеров ДНК окружающей среды (еДНК) для обнаружения находящихся под угрозой исчезновения водных млекопитающих». Ресурсы по сохранению генетики. 8 (4): 561–568. Дои:10.1007 / s12686-016-0597-9. ISSN  1877-7252. S2CID  1613649.
  18. ^ Д'Амор, Розалинда; Иджаз, Умер Зишан; Ширмер, Мелани; Кенни, Джон Дж .; Грегори, Ричард; Дарби, Алистер К .; Шакья, Мигун; Подар, Мирча; Айва, Кристофер (2016-01-14). «Комплексное сравнительное исследование протоколов и платформ секвенирования для профилирования сообщества 16S рРНК». BMC Genomics. 17 (1): 55. Дои:10.1186 / s12864-015-2194-9. ISSN  1471-2164. ЧВК  4712552. PMID  26763898.
  19. ^ Kress, W. J .; Эриксон, Д. Л. (26 февраля 2008 г.). «Штрих-коды ДНК: гены, геномика и биоинформатика». Труды Национальной академии наук. 105 (8): 2761–2762. Bibcode:2008PNAS..105.2761K. Дои:10.1073 / pnas.0800476105. ISSN  0027-8424. ЧВК  2268532. PMID  18287050.
  20. ^ а б c d е Пурти Р.С., Чаттерджи С. "Штрих-кодирование ДНК: эффективный метод в молекулярной таксономии". Остин Журнал биотехнологии и биоинженерии. 3 (1): 1059.
  21. ^ а б Hebert, Paul D.N .; Ратнасингхам, Судживан; де Ваард, Джереми Р. (07.08.2003). «Штрих-кодирование жизни животных: расхождения субъединицы 1 цитохром с оксидазы среди близкородственных видов». Труды Королевского общества B: биологические науки. 270 (Suppl_1): S96-9. Дои:10.1098 / рсбл.2003.0025. ISSN  1471-2954. ЧВК  1698023. PMID  12952648.
  22. ^ Блэкстер, Марк Л. (2004-04-29). Годфрей, Х. С. Дж .; Кнапп, С. (ред.). «Обещание таксономии ДНК». Философские труды Лондонского королевского общества. Серия B: Биологические науки. 359 (1444): 669–679. Дои:10.1098 / rstb.2003.1447. ISSN  1471-2970. ЧВК  1693355. PMID  15253352.
  23. ^ Fazekas, Aron J .; Берджесс, Кевин С .; Kesanakurti, Prasad R .; Грэм, Шон У .; Newmaster, Стивен Дж .; Муж, Брайан Ч .; Перси, Диана М .; Хаджибабаи, Мехрдад; Барретт, Спенсер К. Х. (30 июля 2008 г.). ДеСалл, Роберт (ред.). «Множественные мультилокусные штрих-коды ДНК из пластидного генома одинаково хорошо различают виды растений». PLOS ONE. 3 (7): e2802. Bibcode:2008PLoSO ... 3.2802F. Дои:10.1371 / journal.pone.0002802. ISSN  1932-6203. ЧВК  2475660. PMID  18665273.
  24. ^ Кресс, У. Джон; Эриксон, Дэвид Л. (2007-06-06). Шиу, Шин-Хан (ред.). «Глобальный штрих-код ДНК с двумя локусами для наземных растений: кодирующий ген rbcL дополняет некодирующую спейсерную область trnH-psbA». PLOS ONE. 2 (6): e508. Bibcode:2007PLoSO ... 2..508K. Дои:10.1371 / journal.pone.0000508. ISSN  1932-6203. ЧВК  1876818. PMID  17551588.
  25. ^ Janda, J.M .; Эбботт, С. Л. (2007-09-01). «Секвенирование гена 16S рРНК для бактериальной идентификации в диагностической лаборатории: плюсы, опасности и ловушки». Журнал клинической микробиологии. 45 (9): 2761–2764. Дои:10.1128 / JCM.01228-07. ISSN  0095-1137. ЧВК  2045242. PMID  17626177.
  26. ^ а б Смит, М. Алекс; Бертран, Клаудиа; Кросби, Кейт; Eveleigh, Eldon S .; Фернандес-Триана, Хосе; Фишер, Брайан Л .; Гиббс, Джейсон; Хаджибабаи, Мехрдад; Холлвакс, Винни (2012-05-02). Барсук, Джонатан Х. (ред.). "Вольбахия и штрих-кодирование ДНК насекомых: закономерности, возможности и проблемы ". PLOS ONE. 7 (5): e36514. Bibcode:2012PLoSO ... 736514S. Дои:10.1371 / journal.pone.0036514. ISSN  1932-6203. ЧВК  3342236. PMID  22567162.
  27. ^ а б Ссылки, Мэтью Дж .; Dumonceaux, Tim J .; Hemmingsen, Sean M .; Хилл, Джанет Э. (26 ноября 2012 г.). Нойфельд, Джош (ред.). «Универсальная мишень шаперонина-60 - это штрих-код для бактерий, который позволяет De Novo собирать данные метагеномной последовательности». PLOS ONE. 7 (11): e49755. Bibcode:2012PLoSO ... 749755L. Дои:10.1371 / journal.pone.0049755. ISSN  1932-6203. ЧВК  3506640. PMID  23189159.
  28. ^ а б Case, R.J .; Boucher, Y .; Dahllof, I .; Holmstrom, C .; Дулиттл, В. Ф .; Кьеллеберг, С. (01.01.2007). «Использование генов 16S рРНК и rpoB в качестве молекулярных маркеров для исследований микробной экологии». Прикладная и экологическая микробиология. 73 (1): 278–288. Дои:10.1128 / AEM.01177-06. ISSN  0099-2240. ЧВК  1797146. PMID  17071787.
  29. ^ Беллемейн, Ева; Карлсен, Тор; Брохманн, Кристиан; Куассак, Эрик; Таберле, Пьер; Каузеруд, Ховард (2010). «ЕГО как штрих-код ДНК окружающей среды для грибов: подход in silico выявляет потенциальные ошибки ПЦР». BMC Microbiology. 10 (1): 189. Дои:10.1186/1471-2180-10-189. ISSN  1471-2180. ЧВК  2909996. PMID  20618939.
  30. ^ Зейферт, К. А .; Самсон, Р. А .; deWaard, J. R .; Houbraken, J .; Levesque, C.A .; Moncalvo, J.-M .; Louis-Seize, G .; Хеберт, П. Д. Н. (2007-03-06). "Перспективы идентификации грибов с использованием штрих-кодов ДНК CO1, с Пенициллий как тестовый пример ". Труды Национальной академии наук. 104 (10): 3901–3906. Дои:10.1073 / pnas.0611691104. ISSN  0027-8424. ЧВК  1805696. PMID  17360450.
  31. ^ Dentinger, Bryn T. M .; Дидух, Марина Юрьевна; Монкальво, Жан-Марк (22 сентября 2011). Шируотер, Бернд (ред.). «Сравнение COI и ITS в качестве маркеров штрих-кода ДНК для грибов и родственных им грибов (Agaricomycotina)». PLOS ONE. 6 (9): e25081. Bibcode:2011PLoSO ... 625081D. Дои:10.1371 / journal.pone.0025081. ISSN  1932-6203. ЧВК  3178597. PMID  21966418.
  32. ^ а б Хаунд, Полашри; Джоши, С. (Октябрь 2014 г.). «Штрих-кодирование ДНК диких съедобных грибов, потребляемых этническими племенами Индии». Ген. 550 (1): 123–130. Дои:10.1016 / j.gene.2014.08.027. PMID  25130907.
  33. ^ Лобо, Хорхе; Коста, Педро М.; Тейшейра, Маркос А.Л .; Феррейра Мария С.Г .; Коста, Мария Х; Коста, Филипе О (2013). «Улучшенные праймеры для амплификации штрих-кодов ДНК от широкого спектра морских многоклеточных животных». BMC Ecology. 13 (1): 34. Дои:10.1186/1472-6785-13-34. ISSN  1472-6785. ЧВК  3846737. PMID  24020880.
  34. ^ Yacoub, Haitham A .; Fathi, Moataz M .; Садек, Махмуд А. (04.03.2015). «Использование гена цитохрома b мтДНК в качестве маркера штрих-кодирования ДНК в линиях кур». Митохондриальная ДНК. 26 (2): 217–223. Дои:10.3109/19401736.2013.825771. ISSN  1940-1736. PMID  24020964. S2CID  37802920.
  35. ^ Сиддаппа, Чандра Мохан; Шайни, Мохини; Дас, Асит; Доресвами, Рамеш; Шарма, Анил К .; Гупта, Правин К. (2013). «Характеристика последовательности митохондриального гена 12S рРНК у мышей оленей (Москиола индика) для идентификации видов на основе ПЦР-ПДРФ ". Международная молекулярная биология. 2013: 783925. Дои:10.1155/2013/783925. ISSN  2090-2182. ЧВК  3885226. PMID  24455258.
  36. ^ Vences, Мигель; Томас, Мейке; ван дер Мейден, Арье; Киари, Иления; Вайтес, Дэвид Р. (16 марта 2005 г.). «Сравнительная эффективность гена 16S рРНК при штрих-кодировании ДНК амфибий». Границы зоологии. 2 (1): 5. Дои:10.1186/1742-9994-2-5. ISSN  1742-9994. ЧВК  555853. PMID  15771783.
  37. ^ Чен, Шилин; Яо, Хуэй; Хан, Цзяньпин; Лю, Чанг; Сун, Цзинъюань; Ши, Линьчунь; Чжу, Инцзе; Ма, Синье; Гао, Тин (07.01.2010). Гилберт, М. Томас П. (ред.). «Валидация области ITS2 в качестве нового штрих-кода ДНК для идентификации видов лекарственных растений». PLOS ONE. 5 (1): e8613. Bibcode:2010PLoSO ... 5.8613C. Дои:10.1371 / journal.pone.0008613. ISSN  1932-6203. ЧВК  2799520. PMID  20062805.
  38. ^ Теодоридис, Спирос; Стефанаки, Анастасия; Тезкан, Мельтем; Аки, Джунейт; Коккини, Стелла; Влахонасиос, Константинос Э. (июль 2012 г.). «Штрих-кодирование ДНК в местных растениях семейства Labiatae (Lamiaceae) с острова Хиос (Греция) и прилегающего полуострова Чешме-Карабурун (Турция)». Ресурсы по молекулярной экологии. 12 (4): 620–633. Дои:10.1111 / j.1755-0998.2012.03129.x. PMID  22394710. S2CID  2227349.
  39. ^ Ян, Инь; Чжай, Яньхун; Лю, Тао; Чжан, Фанминь; Цзи, Юньхэн (январь 2011 г.). "Обнаружение Валериана Джатаманси в качестве примеси лекарственного Париж по вариации длины хлоропласта psbА-трнH регион " (PDF). Planta Medica. 77 (1): 87–91. Дои:10.1055 / с-0030-1250072. ISSN  0032-0943. PMID  20597045.
  40. ^ Гао, Тин; Яо, Хуэй; Сун, Цзинъюань; Лю, Чанг; Чжу, Инцзе; Ма, Синье; Пан, Сяохуэй; Сюй, Хунси; Чен, Шилин (июль 2010 г.). «Идентификация лекарственных растений семейства Fabaceae с использованием потенциального штрих-кода ДНК ITS2». Журнал этнофармакологии. 130 (1): 116–121. Дои:10.1016 / j.jep.2010.04.026. PMID  20435122.
  41. ^ Weisburg WG; Сараи СМ; Пеллетье DA; Лейн DJ (1991). «Амплификация рибосомальной ДНК 16S для филогенетических исследований». Журнал бактериологии. 173 (2): 697–703. Дои:10.1128 / jb.173.2.697-703.1991. ЧВК  207061. PMID  1987160.
  42. ^ Макарова, Ольга; Контальдо, Николетта; Палтриньери, Саманта; Кавубе, Джеофри; Бертаччини, Ассунта; Николайсен, Могенс (18 декабря 2012 г.). Ву, Патрик CY. (ред.). «Штрих-кодирование ДНК для идентификации« Candidatus Phytoplasmas »с использованием фрагмента гена фактора элонгации Tu». PLOS ONE. 7 (12): e52092. Bibcode:2012PLoSO ... 752092M. Дои:10.1371 / journal.pone.0052092. ISSN  1932-6203. ЧВК  3525539. PMID  23272216.
  43. ^ Шнайдер, Кевин Л .; Марреро, Глоримар; Альварес, Энн М .; Престинг, Гернот Г. (21.04.2011). Бересвилл, Стефан (ред.). «Классификация ассоциированных с растениями бактерий с использованием RIF, ДНК-маркера, полученного с помощью компьютерных методов». PLOS ONE. 6 (4): e18496. Bibcode:2011PLoSO ... 618496S. Дои:10.1371 / journal.pone.0018496. ISSN  1932-6203. ЧВК  3080875. PMID  21533033.
  44. ^ Лю, Линь; Хуан, Сяолей; Чжан, Жюль; Цзян, Лиюнь; Цяо, Гексия (январь 2013 г.). "Филогенетическое соответствие между Моллитрихозифум (Aphididae: Greenideinae) и Бухнера указывает на параллельную эволюцию насекомых-бактерий ». Систематическая энтомология. 38 (1): 81–92. Дои:10.1111 / j.1365-3113.2012.00647.x. S2CID  84702103.
  45. ^ Гао, Жуйфан; Чжан, Гуйминь (ноябрь 2013 г.). «Возможности штрих-кодирования ДНК для обнаружения карантинных грибов». Фитопатология. 103 (11): 1103–1107. Дои:10.1094 / PHYTO-12-12-0321-R. ISSN  0031-949X. PMID  23718836.
  46. ^ Stielow, J. B .; Lévesque, C.A .; Зейферт, К. А .; Meyer, W .; Ириний, Л .; Smits, D .; Renfurm, R .; Verkley, G. J. M .; Groenewald, M .; Чадули, Д .; Lomascolo, A .; Welti, S .; Lesage-Meessen, L .; Favel, A .; Аль-Хатми, А.М. С .; Damm, U .; Yilmaz, N .; Houbraken, J .; Lombard, L .; Quaedvlieg, W .; Binder, M .; Ваас, Л. А. И .; Ву, Д .; Юрков, А .; Begerow, D .; Roehl, O .; Guerreiro, M .; Fonseca, A .; Самерпитак, К .; van Diepeningen, A.D .; Долатабади, S .; Морено, Л. Ф .; Casaregola, S .; Mallet, S .; Jacques, N .; Roscini, L .; Egidi, E .; Bizet, C .; Garcia-Hermoso, D .; Martín, M. P .; Deng, S .; Groenewald, J. Z .; Боеут, Т .; de Beer, Z. W .; Barnes, I .; Duong, T. A .; Wingfield, M. J .; де Хуг, Г. С .; Crous, P.W .; Lewis, C.T .; Hambleton, S .; Moussa, T. A. A .; Аль-Захрани, Х. С .; Almaghrabi, O.A .; Louis-Seize, G .; Assabgui, R .; McCormick, W .; Omer, G .; Дукик, К .; Cardinali, G .; Eberhardt, U .; de Vries, M .; Роберт В. (2015). «Один гриб, какие гены? Разработка и оценка универсальных праймеров для потенциальных вторичных штрих-кодов ДНК грибов». Persoonia. 35: 242–263. Дои:10.3767 / 003158515X689135. ЧВК  4713107. PMID  26823635.
  47. ^ Мейер, Виланд; Ириний, Ласло; Минь, Туи Ви Хоанг; Роберт, Винсент; Гарсиа-Эрмосо, Деа; Деснос-Оливье, Мари; Юраярт, Чомпоонек; Цанг, Чи-Цзин; Ли, Чун-И; Ву, Патрик С. Ю.; Пчелин, Иван Михайлович; Урласс, Силке; Ненофф, Пьетро; Чиндампорн, Ария; Чен, Шарон; Hebert, Paul D. N .; Соррелл, Таня С .; Рабочая группа ISHAM по штрих-кодированию патогенных грибов (2018). «Создание базы данных для фактора удлинения трансляции вторичного штрих-кода ДНК грибов 1α (TEF1α)». Геном. 62 (3): 160–169. Дои:10.1139 / gen-2018-0083. PMID  30465691.
  48. ^ Gile, Gillian H .; Стерн, Ровена Ф .; Джеймс, Эрик Р .; Килинг, Патрик Дж. (Август 2010 г.). «Штрих-кодирование ДНК Chlorarachniophytes с использованием последовательностей ITS нуклеоморфа». Журнал психологии. 46 (4): 743–750. Дои:10.1111 / j.1529-8817.2010.00851.x. S2CID  26529105.
  49. ^ Strüder-Kypke, Michaela C .; Линн, Денис Х. (25 марта 2010 г.). «Сравнительный анализ гена субъединицы I митохондриальной цитохром с оксидазы (COI) у инфузорий (Alveolata, Ciliophora) и оценка его пригодности в качестве маркера биоразнообразия». Систематика и биоразнообразие. 8 (1): 131–148. Дои:10.1080/14772000903507744. ISSN  1477-2000. S2CID  83996912.
  50. ^ а б Хамшер, Сара Э .; LeGresley, Murielle M .; Мартин, Дженнифер Л .; Сондерс, Гэри В. (2013-10-09). Крэндалл, Кейт А. (ред.). "Сравнение морфологических и молекулярных исследований для оценки видового богатства Chaetoceros и Thalassiosira (Bacillariophyta) в заливе Фанди ». PLOS ONE. 8 (10): e73521. Bibcode:2013PLoSO ... 873521H. Дои:10.1371 / journal.pone.0073521. ISSN  1932-6203. ЧВК  3794052. PMID  24130665.
  51. ^ Качмарска, Ирена; Эрман, Джеймс Майкл; Мониш, Моника Баррос Джойс; Давидович, Николай (сентябрь 2009 г.). «Фенотипическая и генетическая структура межпородных популяций диатомовых водорослей. Tabularia fasciculata (Bacillariophyta) ». Phycologia. 48 (5): 391–403. Дои:10.2216/08-74.1. ISSN  0031-8884. S2CID  84919305.
  52. ^ Вейганд, Ханна; Beermann, Arne J .; Чампор, Федор; Costa, Filipe O .; Чабай, Золтан; Дуарте, София; Гейгер, Маттиас Ф .; Грабовский, Михал; Риме, Фредерик (14 марта 2019 г.). «Справочные библиотеки штрих-кодов ДНК для мониторинга водной биоты в Европе: анализ пробелов и рекомендации для будущей работы». bioRxiv. 678: 499–524. Bibcode:2019ScTEn.678..499W. Дои:10.1101/576553. HDL:11250/2608962. PMID  31077928. S2CID  92160002.
  53. ^ Rdmpage (2016), Международный проект «Штрих-код жизни» (iBOL) (Набор данных), Институт биоразнообразия, здоровья животных и сравнительной медицины, Колледж медицинских, ветеринарных и биологических наук, Университет Глазго, Дои:10.15468 / inygc6, получено 2019-05-14
  54. ^ Ратнасингхам, Судживан; Хеберт, Пол Д. Н. (24 января 2007 г.). "СТАРТОВЫЕ КОДИРОВКИ: жирный: Штрих-код системы данных о жизни (http://www.barcodinglife.org): СТАРТОВЫЕ КОДЫ". Заметки о молекулярной экологии. 7 (3): 355–364. Дои:10.1111 / j.1471-8286.2007.01678.x. ЧВК  1890991. PMID  18784790.
  55. ^ Нильссон, Рольф Хенрик; Ларссон, Карл-Хенрик; Тейлор, Энди Ф. С .; Бенгтссон-Пальме, Йохан; Jeppesen, Thomas S .; Шигель, Дмитрий; Кеннеди, Питер; Пикард, Кэтрин; Глёкнер, Фрэнк Оливер (8 января 2019 г.). «База данных UNITE для молекулярной идентификации грибов: работа с темными таксонами и параллельные таксономические классификации». Исследования нуклеиновых кислот. 47 (D1): D259 – D264. Дои:10.1093 / нар / gky1022. ISSN  0305-1048. ЧВК  6324048. PMID  30371820.
  56. ^ Римет, Фредерик; Гусев Евгений; Калерт, Мария; Келли, Мартин; Куликовский, Максим; Мальцев Евгений; Манн, Дэвид; Пфаннкухен, Мартин; Тробахо, Роза (14 февраля 2019 г.). «Diat.barcode, библиотека штрих-кодов открытого доступа для диатомовых водорослей» (набор данных). Portail Data Inra. Дои:10.15454 / TOMBYZ. Цитировать журнал требует | журнал = (помощь)
  57. ^ Риме, Фредерик; Шомей, Филипп; Кек, Франсуа; Кермаррек, Ленаиг; Васселон, Валентин; Калерт, Мария; Франк, Ален; Бушез, Аньес (2016). «R-Syst :: diatom: открытая и тщательно подобранная база данных штрих-кодов для мониторинга диатомовых водорослей и пресной воды». База данных. 2016: baw016. Дои:10.1093 / база данных / baw016. ISSN  1758-0463. ЧВК  4795936. PMID  26989149.
  58. ^ Schloss, Patrick D .; Весткотт, Сара Л .; Рябин, Томас; Холл, Жюстин Р .; Хартманн, Мартин; Холлистер, Эмили Б.; Лесневски, Райан А .; Окли, Брайан Б.; Парки, Донован Х .; Робинсон, Кортни Дж .; Сахл, Джейсон У .; Стрес, Блаж .; Thallinger, Gerhard G .; Хорн, Дэвид Дж .; фургон. Вебер, Кэрол Ф. (2009). «Представляем mothur: программное обеспечение с открытым исходным кодом, независимое от платформы, поддерживаемое сообществом, для описания и сравнения сообществ микробов». Прикладная и экологическая микробиология. 75 (23): 7537–41. Дои:10.1128 / AEM.01541-09. OCLC  780918718. ЧВК  2786419. PMID  19801464.
  59. ^ Эдгар, Роберт С. (18.08.2013). «UPARSE: высокоточные последовательности OTU из микробных считываний ампликона». Методы природы. 10 (10): 996–998. Дои:10.1038 / nmeth.2604. ISSN  1548-7091. PMID  23955772. S2CID  7181682.
  60. ^ Капорасо, Дж. Грегори; Кучинский, Джастин; Stombaugh, Джесси; Биттингер, Кайл; Бушмен, Фредерик Д.; Костелло, Элизабет К; Фирер, Ной; Пенья, Антонио Гонсалес; Гудрич, Юлия К. (май 2010 г.). «QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью». Методы природы. 7 (5): 335–336. Дои:10.1038 / nmeth.f.303. ISSN  1548-7091. ЧВК  3156573. PMID  20383131.
  61. ^ Афган, Энис; Бейкер, Даннон; Батют, Беренис; ван ден Бик, Мариус; Бувье, Дэйв; Чех, Мартин; Чилтон, Джон; Клементс, Дэйв; Кораор, Нейт (2018-07-02). «Платформа Galaxy для доступных, воспроизводимых и совместных биомедицинских анализов: обновление 2018 г.». Исследования нуклеиновых кислот. 46 (W1): W537 – W544. Дои:10.1093 / нар / gky379. ISSN  0305-1048. ЧВК  6030816. PMID  29790989.
  62. ^ Бойер, Фредерик; Мерсье, Селин; Бонин, Орели; Ле Бра, Иван; Таберле, Пьер; Куассак, Эрик (26 мая 2015 г.). "obitools: программный пакет, созданный на основе aunix, для метабаркодирования ДНК". Ресурсы по молекулярной экологии. 16 (1): 176–182. Дои:10.1111/1755-0998.12428. ISSN  1755-098X. PMID  25959493. S2CID  39412858.
  63. ^ Эльбрехт, Васко (30.04.2019), GitHub - VascoElbrecht / JAMP: JAMP: еще один конвейер метабаркодирования., получено 2019-05-14
  64. ^ Нормандо, Эрик (21.01.2020), GitHub - hugeandeau / barque: Barque: Анализ метабаркодирования ДНК окружающей среды., получено 2020-01-21
  65. ^ Каллахан, Бенджамин Дж; Макмерди, Пол Дж; Розен, Майкл Дж; Хан, Эндрю В; Джонсон, Эми Джо А; Холмс, Сьюзан П. (июль 2016 г.). «DADA2: вывод образца с высоким разрешением из данных ампликона Illumina». Методы природы. 13 (7): 581–583. Дои:10.1038 / nmeth.3869. ISSN  1548-7091. ЧВК  4927377. PMID  27214047.
  66. ^ Макмерди, Пол Дж .; Холмс, Сьюзен (2014). "Не тратьте, не хотите: почему разрежение данных микробиома недопустимо". PLOS вычислительная биология. 10 (4): e1003531. arXiv:1310.0424. Bibcode:2014PLSCB..10E3531M. Дои:10.1371 / journal.pcbi.1003531. ЧВК  3974642. PMID  24699258.
  67. ^ Валиенте, Габриэль; Янссон, Джеспер; Клементе, Хосе Карлос; Алонсо-Алемани, Даниэль (10.10.2011). «Таксономическое присвоение в метагеномике с TANGO». EMBnet.journal. 17 (2): 16–20. Дои:10.14806 / ej.17.2.237. ISSN  2226-6089.
  68. ^ а б Шнелл, Ида Бёрхольм; Томсен, Филип Фрэнсис; Уилкинсон, Николас; Расмуссен, Мортен; Jensen, Lars R.D .; Виллерслев, Эске; Бертельсен, Мадс Ф .; Гилберт, М. Томас П. (апрель 2012 г.). «Скрининг биоразнообразия млекопитающих с использованием ДНК пиявок». Текущая биология. 22 (8): R262 – R263. Дои:10.1016 / j.cub.2012.02.058. PMID  22537625. S2CID  18058748.
  69. ^ Субрата., Триведи (2016). Штрих-кодирование ДНК в морской перспективе: оценка и сохранение биоразнообразия. Ансари, Абид Али., Гош, Санкар К., Рехман, Хасибур. Чам: Издательство Springer International. ISBN  9783319418407. OCLC  958384953.
  70. ^ Hebert, Paul D. N .; Stoeckle, Mark Y .; Землак, Тайлер С .; Фрэнсис, Чарльз М. (октябрь 2004 г.). «Идентификация птиц с помощью штрих-кодов ДНК». PLOS Биология. 2 (10): e312. Дои:10.1371 / journal.pbio.0020312. ISSN  1545-7885. ЧВК  518999. PMID  15455034.
  71. ^ Коста, Филипе О; Карвалью, Гэри Р. (декабрь 2007 г.). «Инициатива« Штрих-код жизни »: синопсис и предполагаемое влияние на общество штрих-кодирования ДНК рыб». Геномика, общество и политика. 3 (2): 29. Дои:10.1186/1746-5354-3-2-29. ISSN  1746-5354. ЧВК  5425017.
  72. ^ Lahaye, R .; van der Bank, M .; Богарин, Д .; Warner, J .; Пупулин, Ф .; Gigot, G .; Maurin, O .; Duthoit, S .; Барраклаф, Т. Г. (26 февраля 2008 г.). «Штрих-кодирование ДНК флоры горячих точек биоразнообразия». Труды Национальной академии наук. 105 (8): 2923–2928. Дои:10.1073 / pnas.0709936105. ISSN  0027-8424. ЧВК  2268561. PMID  18258745.
  73. ^ а б Сюй, Сун-Чжи; Ли, Чжэнь-Ю; Цзинь, Сяо-Хуа (январь 2018 г.). «Штрих-кодирование ДНК инвазивных растений в Китае: ресурс для идентификации инвазивных растений». Ресурсы по молекулярной экологии. 18 (1): 128–136. Дои:10.1111/1755-0998.12715. PMID  28865184. S2CID  24911390.
  74. ^ Лю, Цзюньнин; Цзян, Цзиамей; Песня, Шули; Торнабене, Люк; Хабаррия, Райан; Naylor, Gavin J. P .; Ли, Ченхун (декабрь 2017 г.). «Мультилокусное штрих-кодирование ДНК - идентификация видов с мультилокусными данными». Научные отчеты. 7 (1): 16601. Bibcode:2017НатСР ... 716601Л. Дои:10.1038 / s41598-017-16920-2. ISSN  2045-2322. ЧВК  5709489. PMID  29192249.
  75. ^ Нагоши, Родни Н .; Брамбила, Джульета; Мигер, Роберт Л. (ноябрь 2011 г.). "Использование штрих-кодов ДНК для идентификации инвазивного армейского червя. Spodoptera виды во Флориде ". Журнал науки о насекомых. 11 (154): 154. Дои:10.1673/031.011.15401. ISSN  1536-2442. ЧВК  3391933. PMID  22239735.
  76. ^ Тонгтам на Аюдхая, Прадипунт; Муангмай, Наронгрит; Банджонгсат, Нувади; Сингчат, Ворапонг; Джанекиткарн, Соммаи; Пейачокнагул, Сурин; Шрикульнатх, Корнсорн (июнь 2017 г.). "Раскрытие загадочного разнообразия родов анемоновых рыб Амфиприон и Премнас (Perciformes: Pomacentridae) в Таиланде со штрих-кодами митохондриальной ДНК ". Сельское хозяйство и природные ресурсы. 51 (3): 198–205. Дои:10.1016 / j.anres.2017.07.001.
  77. ^ Hebert, P. D. N .; Penton, E.H .; Burns, J.M .; Janzen, D. H .; Hallwachs, W. (2004-10-12). «Десять видов в одном: штрих-кодирование ДНК позволяет выявить загадочные виды в неотропической бабочке-шкипере». Astraptes fulgerator". Труды Национальной академии наук. 101 (41): 14812–14817. Bibcode:2004PNAS..10114812H. Дои:10.1073 / pnas.0406166101. ISSN  0027-8424. ЧВК  522015. PMID  15465915.
  78. ^ Брауэр, Эндрю В.З. (Июнь 2006 г.). «Проблемы со штрих-кодами ДНК для определения границ видов:« Десять видов » Astraptes fulgerator переоценка (Lepidoptera: Hesperiidae) ". Систематика и биоразнообразие. 4 (2): 127–132. Дои:10.1017 / S147720000500191X. ISSN  1477-2000. S2CID  54687052.
  79. ^ Smith, M. A .; Woodley, N.E .; Janzen, D. H .; Hallwachs, W .; Хеберт, П. Д. Н. (2007-03-07). «Штрих-коды ДНК выявляют скрытую специфичность хозяина в пределах предполагаемых многоядных представителей рода паразитоидных мух (Diptera: Tachinidae)». Труды Национальной академии наук. 103 (10): 3657–3662. Дои:10.1073 / pnas.0511318103. ISSN  0027-8424. ЧВК  1383497. PMID  16505365.
  80. ^ Brasier, Madeleine J .; Виклунд, Елена; Нил, Ленка; Джеффрис, Рэйчел; Линсе, Катрин; Рул, Генри; Гловер, Адриан Г. (ноябрь 2016 г.). «Штрих-кодирование ДНК раскрывает загадочное разнообразие у 50% глубоководных антарктических полихет». Королевское общество открытой науки. 3 (11): 160432. Bibcode:2016RSOS .... 360432B. Дои:10.1098 / rsos.160432. ISSN  2054-5703. ЧВК  5180122. PMID  28018624.
  81. ^ Помпанон, Франсуа; Дигл, Брюс Э .; Symondson, William O.C .; Браун, Дэвид С .; Jarman, Simon N .; Таберле, Пьер (апрель 2012 г.). «Кто что ест: оценка диеты с использованием секвенирования следующего поколения: АНАЛИЗ ДИЕТЫ NGS». Молекулярная экология. 21 (8): 1931–1950. Дои:10.1111 / j.1365-294X.2011.05403.x. PMID  22171763. S2CID  10013333.
  82. ^ Валентини, Алиса; Помпанон, Франсуа; Таберле, Пьер (февраль 2009 г.). «Штрих-кодирование ДНК для экологов». Тенденции в экологии и эволюции. 24 (2): 110–117. Дои:10.1016 / j.tree.2008.09.011. PMID  19100655.
  83. ^ а б c Kaunisto, Kari M .; Рослин, Томас; Sääksjärvi, Ilari E .; Вестеринен, Ээро Дж. (Октябрь 2017 г.). «Гранулы доказательства: первое знакомство с диетическим составом взрослых стрекоз, выявленным при метабаркодировании кала». Экология и эволюция. 7 (20): 8588–8598. Дои:10.1002 / ece3.3404. ЧВК  5648679. PMID  29075474.
  84. ^ Хармс-Туохи, Калифорния; Schizas, Nv; Аппелдорн, рупии (2016-10-25). "Использование метабаркодирования ДНК для анализа содержимого желудка инвазивных крылаток. Pterois volitans в Пуэрто-Рико ". Серия "Прогресс морской экологии". 558: 181–191. Bibcode:2016MEPS..558..181H. Дои:10,3354 / meps11738. ISSN  0171-8630.
  85. ^ Ковальчик, Рафал; Таберле, Пьер; Куассак, Эрик; Валентини, Алиса; Микель, Кристиан; Камински, Томаш; Вуйчик, Ян М. (февраль 2011 г.). «Влияние хозяйственной практики на диету крупных травоядных - пример европейского зубра в Беловежской пуще (Польша)». Экология и управление лесами. 261 (4): 821–828. Дои:10.1016 / j.foreco.2010.11.026.
  86. ^ Николс, Рут V .; Cromsigt, Joris P.G.M .; Спонг, Горан (декабрь 2015 г.). «Использование eDNA для экспериментальной проверки предпочтений просмотра копытными животными». SpringerPlus. 4 (1): 489. Дои:10.1186 / s40064-015-1285-z. ISSN  2193-1801. ЧВК  4565800. PMID  26380165.
  87. ^ Agusti, N .; Shayler, S.P .; Harwood, J.D .; Vaughan, I.P .; Сандерленд, К. Д .; Саймондсон, В. О. К. (декабрь 2003 г.). «Коллембола как альтернативная добыча пауков в пахотных экосистемах: обнаружение добычи у хищников с использованием молекулярных маркеров». Молекулярная экология. 12 (12): 3467–3475. Дои:10.1046 / j.1365-294X.2003.02014.x. ISSN  0962-1083. PMID  14629361. S2CID  7985256.
  88. ^ Валентини, Алиса; Микель, Кристиан; Наваз, Мухаммед Али; Беллемейн, Ева; Куассак, Эрик; Помпанон, Франсуа; Гилли, Людовик; Круод, Коринн; Насчетти, Джузеппе (январь 2009 г.). «Новые перспективы в анализе диеты на основе штрих-кодирования ДНК и параллельного пиросеквенирования: подход trn L». Ресурсы по молекулярной экологии. 9 (1): 51–60. Дои:10.1111 / j.1755-0998.2008.02352.x. PMID  21564566. S2CID  5308081.
  89. ^ Фридман, Мелисса; Фернандес, Мерседес; Бэкер, Лоррейн; Дики, Роберт; Бернштейн, Джеффри; Шранк, Кэтлин; Киблер, Стивен; Стефан, Венди; Гриббл, Мэтью (14 марта 2017 г.). «Обновленный обзор отравления рыбой сигуатера: клиническое, эпидемиологическое, экологическое и общественное здравоохранение». Морские препараты. 15 (3): 72. Дои:10.3390 / md15030072. ISSN  1660-3397. ЧВК  5367029. PMID  28335428.
  90. ^ а б c d е ж Павловский, Ян; Келли-Куинн, Мэри; Альтерматт, Флориан; Апотелос-Перре-Жантиль, Лор; Бежа, Педро; Боггеро, Анджела; Борха, Ангел; Бушез, Аньес; Кордье, Тристан (2018). «Будущее биотических индексов в экуогеномную эру: интеграция (д) метабаркодирования ДНК в биологическую оценку водных экосистем». Наука об окружающей среде в целом. 637–638: 1295–1310. Bibcode:2018ScTEn.637.1295P. Дои:10.1016 / j.scitotenv.2018.05.002. PMID  29801222.
  91. ^ Армитаж, Патрик Д .; Крэнстон, Питер С .; Пиндер, Л. К. В., ред. (1995). Хирономиды. Дордрехт: Springer, Нидерланды. Дои:10.1007/978-94-011-0715-0. ISBN  9789401043083. S2CID  46138170.
  92. ^ Beermann, Arne J .; Жижка, Вера М. А .; Эльбрехт, Васко; Баранов Виктор; Лиз, Флориан (24.07.2018). «Метабаркодирование ДНК выявляет сложные и скрытые реакции хирономид на множественные стрессоры». Науки об окружающей среде Европы. 30 (1): 26. Дои:10.1186 / с12302-018-0157-х. ISSN  2190-4715. S2CID  51802465.
  93. ^ Beermann, Arne J .; Эльбрехт, Васко; Карнац, Свенья; Ма, Ли; Matthaei, Christoph D .; Пигготт, Джереми Дж .; Лиз, Флориан (2018). «Множественные стрессорные эффекты на сообществах макробеспозвоночных водотоков: эксперимент в мезокосме, регулирующий соленость, мелкие отложения и скорость потока». Наука об окружающей среде в целом. 610–611: 961–971. Bibcode:2018ScTEn.610..961B. Дои:10.1016 / j.scitotenv.2017.08.084. PMID  28830056.
  94. ^ Macher, Jan N .; Salis, Romana K .; Блейкмор, Кэти С .; Толлриан, Ральф; Matthaei, Christoph D .; Лиз, Флориан (2016). «Множественные стрессорные эффекты на речных беспозвоночных: штрих-кодирование ДНК выявляет противоположные реакции загадочных видов поденок». Экологические показатели. 61: 159–169. Дои:10.1016 / j.ecolind.2015.08.024.
  95. ^ «Международный консорциум штрих-кода жизни». Международный штрих-код жизни. Получено 2019-03-29.
  96. ^ "Bold Systems v4". www.boldsystems.org. Получено 2019-04-02.
  97. ^ а б Огванг, Джоэл; Барише, Мишель; Бос, Артур Р. (2020). «Генетическое разнообразие и филогенетические взаимоотношения леща тонкоперого (Немиптер spp.) из Красного моря и восточной части Средиземного моря ». Геном. 63: 1–10. Дои:10.1139 / gen-2019-0163. PMID  32678985.
  98. ^ Шандер, Кристофер; Уиллассен, Эндре (2005). «Что может сделать биологическое штрих-кодирование для морской биологии?». Исследования морской биологии. 1 (1): 79–83. Дои:10.1080/17451000510018962. ISSN  1745-1000. S2CID  84070971.
  99. ^ Миллер, С. Э. (20 марта 2007 г.). «Штрих-кодирование ДНК и возрождение таксономии». Труды Национальной академии наук. 104 (12): 4775–4776. Bibcode:2007ПНАС..104.4775М. Дои:10.1073 / pnas.0700466104. ISSN  0027-8424. ЧВК  1829212. PMID  17363473.
  100. ^ Ратнасингхэм, С. (2013). «Регистр на основе ДНК для всех видов животных: система индекса штрих-кода (BIN)». PLOS ONE. 8 (7): e66213. Bibcode:2013PLoSO ... 866213R. Дои:10.1371 / journal.pone.0066213. ЧВК  3704603. PMID  23861743.
  101. ^ Лиз, Флориан; Эльбрехт, Васко (2015-07-08). «Могут ли оценки экосистемы на основе ДНК дать количественную оценку численности видов? Проверка смещения праймера и биомассы - взаимосвязь последовательностей с помощью инновационного протокола метабаркода». PLOS ONE. 10 (7): e0130324. Bibcode:2015PLoSO..1030324E. Дои:10.1371 / journal.pone.0130324. ISSN  1932-6203. ЧВК  4496048. PMID  26154168.
  102. ^ Эльбрехт, Васко; Вамос, Екатерина Эдит; Мейснер, Кристиан; Аровиита, Юкка; Лиз, Флориан (2017). «Оценка сильных и слабых сторон идентификации макробеспозвоночных на основе метабаркодирования ДНК для рутинного мониторинга потока». Методы в экологии и эволюции. 8 (10): 1265–1275. Дои:10.1111 / 2041-210X.12789. ISSN  2041–210X.
  103. ^ а б c Pawlowski, J .; Келли-Куинн, М .; Altermatt, F .; Apothéloz-Perret-Gentil, L .; Beja, P .; Boggero, A .; Borja, A .; Bouchez, A .; Cordier, T .; Домайзон, И .; Feio, M. J .; Filipe, A. F .; Fornaroli, R .; Graf, W .; Herder, J .; Van Der Hoorn, B .; Iwan Jones, J .; Сагова-Марецкова, М .; Moritz, C .; Barquín, J .; Piggott, J. J .; Pinna, M .; Rimet, F .; Ринкевич, Б .; Sousa-Santos, C .; Specchia, V .; Trobajo, R .; Vasselon, V .; Vitecek, S .; и другие. (Октябрь 2018 г.). «Будущее биотических индексов в экогеномную эру: интеграция (E) метабаркодирования ДНК в биологическую оценку водных экосистем». Наука об окружающей среде в целом. 637–638: 1295–1310. Bibcode:2018ScTEn.637.1295P. Дои:10.1016 / j.scitotenv.2018.05.002. PMID  29801222.
  104. ^ Айва, Кристофер; Sloan, Уильям Т .; Холл, Нил; Д'Амор, Розалинда; Ияз, Умер З .; Ширмер, Мелани (2015-03-31). «Понимание систематических ошибок и ошибок секвенирования при секвенировании ампликонов с помощью платформы Illumina MiSeq». Исследования нуклеиновых кислот. 43 (6): e37. Дои:10.1093 / нар / gku1341. ISSN  0305-1048. ЧВК  4381044. PMID  25586220.
  105. ^ Хуанг, Цюаньфэй; Ли, Цзигуан; Фу, Рибей; Тан, мин; Чжоу, Лили; Су, Сюй; Ян, Цин; Лю, Шанлинь; Ли, Юань (1 декабря 2013 г.). «Сверхглубокое секвенирование позволяет с высокой точностью восстановить биоразнообразие для массивных образцов членистоногих без ПЦР-амплификации». GigaScience. 2 (1): 4. Дои:10.1186 / 2047-217X-2-4. ЧВК  3637469. PMID  23587339.
  106. ^ Машер, Ян-Никлас; Жижка, Вера Мари Алида; Вейганд, Александр Мартин; Лиз, Флориан (2018). «Простой протокол центрифугирования для метагеномных исследований увеличивает выход митохондриальной ДНК на два порядка». Методы в экологии и эволюции. 9 (4): 1070–1074. Дои:10.1111 / 2041-210X.12937. ISSN  2041–210X.
  107. ^ «ДНКкваНет». Получено 2019-03-29.
  108. ^ CEN (2018) CEN / TC 230 / РАБОЧАЯ ГРУППА 2 - Предложение о создании новой рабочей группы WG28 «Методы ДНК и eDNA» План по выполнению требований стандартизации ДНК и eDNA в соответствии с законодательством ЕС в области водной политики. (Предложение в соответствии с решениями Берлинского совещания CEN / TC 230 2017 г., его рабочих групп и представителей eDNA COST)
  109. ^ Sloan, Уильям Т .; Читайте, Л. Фиона; Руководитель, Ян М .; Нил Холл; Давенпорт, Рассел Дж .; Curtis, Thomas P .; Лансен, Андерс; Айва, Кристофер (2009). «Точное определение микробного разнообразия по 454 данным пиросеквенирования». Методы природы. 6 (9): 639–641. Дои:10.1038 / nmeth.1361. HDL:1956/6529. ISSN  1548-7105. PMID  19668203. S2CID  1975660.
  110. ^ Кунин Виктор; Энгельбректсон, Анна; Охман, Ховард; Гугенгольц, Филипп (2010). «Морщины в редкой биосфере: ошибки пиросеквенирования могут привести к искусственному завышению оценок разнообразия». Экологическая микробиология. 12 (1): 118–123. Дои:10.1111 / j.1462-2920.2009.02051.x. ISSN  1462-2920. PMID  19725865.
  111. ^ Роб Найт; Ридер, Йенс (2009). «Редкая биосфера»: проверка на реальность ». Методы природы. 6 (9): 636–637. Дои:10.1038 / nmeth0909-636. ISSN  1548-7105. PMID  19718016. S2CID  5278501.
  112. ^ Жан, Айбин; Хулак, Мартин; Сильвестр, Франциско; Хуан, Сяотин; Adebayo, Abisola A .; Abbott, Cathryn L .; Адамович, Сара Дж .; Хит, Дэниел Д.; Кристеску, Мелания Э. (2013). «Высокая чувствительность пиросеквенирования 454 для обнаружения редких видов в водных сообществах». Методы в экологии и эволюции. 4 (6): 558–565. Дои:10.1111 / 2041-210X.12037. ISSN  2041–210X.
  113. ^ Жан, Айбин; Он, Песня; Браун, Эмили А .; Chain, Frédéric J. J .; Therriault, Thomas W .; Abbott, Cathryn L .; Хит, Дэниел Д.; Cristescu, Melania E .; MacIsaac, Хью Дж. (2014). «Воспроизводимость данных пиросеквенирования для оценки биоразнообразия в сложных сообществах». Методы в экологии и эволюции. 5 (9): 881–890. Дои:10.1111 / 2041-210X.12230. ISSN  2041–210X.
  114. ^ Ruppert, Krista M .; Клайн, Ричард Дж .; Рахман, Мд Сайдур (январь 2019 г.). «Прошлые, настоящие и будущие перспективы метабаркодирования экологической ДНК (eDNA): систематический обзор методов, мониторинга и применения глобальной eDNA». Глобальная экология и сохранение. 17: e00547. Дои:10.1016 / j.gecco.2019.e00547.
  115. ^ Стоук, Торстен; Фрюэ, Лариса; Форстер, Доминик; Кордье, Тристан; Мартинс, Катарина И.М .; Павловский, январь (февраль 2018 г.). «Метабаркодирование ДНК в окружающей среде сообществ бентосных бактерий указывает на бентосный след аквакультуры лосося». Бюллетень загрязнения морской среды. 127: 139–149. Дои:10.1016 / j.marpolbul.2017.11.065. PMID  29475645.
  116. ^ Эванс, Даррен М .; Китсон, Джеймс Дж. Н .; Лант, Дэвид Х .; Стро, Найджел А .; Покок, Майкл Дж. О. (2016). «Объединение метабаркодирования ДНК и анализа экологических сетей для понимания и создания устойчивых наземных экосистем» (PDF). Функциональная экология. 30 (12): 1904–1916. Дои:10.1111/1365-2435.12659. ISSN  1365-2435.

внешняя ссылка